Etudes de fixation sur les récepteurs

MultiScreenHTS plates provide the benefits of filtration in a convenient, automation-friendly, 96-well format.

Aperçu

Caractéristiques

Guide d'achat

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Plaques MultiScreenHTS 96 puits avec membrane Durapore (PVDF) Supprimer le tri & les filtres
Référenceicon Descriptionicon Dimension de pores (µm)icon Conditionnementicon
MSDVN6B50MultiScreenHTS-DV, 0,65 µm, opaque, non stérile0,6550 Prix & Disponibilité
MSGVN2B50MultiScreenHTS-GV, 0,22 µm, opaque, non stérile0,2250 Prix & Disponibilité
MSHVN4B50MultiScreenHTS-HV, 0,45 µm, opaque, non stérile0,4550 Prix & Disponibilité

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Plaques MultiScreenHTS 384 puits avec membrane Durapore (PVDF) Supprimer le tri & les filtres
Référenceicon Descriptionicon Dimension de pores (µm)icon Conditionnementicon
MZHVN0W10MultiScreenHTS HV, 0,45 µm, blanc, non stérile0,4510 Prix & Disponibilité
MZHVN0W50MultiScreenHTS HV, 0,45 µm, blanc, non stérile0,4550 Prix & Disponibilité

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Plaques MultiScreenHTS 96 puits avec filtre en fibre de verre Supprimer le tri & les filtres
Référenceicon Descriptionicon Dimension de pores (µm)icon Conditionnementicon
MSFBN6B10MultiScreenHTS-FB, 1,0 / 0,65 µm, opaque, non stérile0,6510 Prix & Disponibilité
MSFBN6B50MultiScreenHTS-FB, 1,0 / 0,65 µm, opaque, non stérile0,6550 Prix & Disponibilité
MSFBNXB50Plaque MultiScreenHTS+ Hi Flow FB1,050 Prix & Disponibilité
MSFCN6B10MultiScreenHTS-FC, 1,2 / 0,65 µm, opaque, non stérile0,6510 Prix & Disponibilité
MSFCN6B50MultiScreenHTS-FC, 1,2 / 0,65 µm, opaque, non stérile0,6550 Prix & Disponibilité
MSFCNXB50Plaque MultiScreenHTS+ FC, Hi Flow, opaque, non stérile1,250 Prix & Disponibilité

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Plaques MultiScreenHTS 384 puits avec filtre en fibre de verre Supprimer le tri & les filtres
Référenceicon Descriptionicon Dimension de pores (µm)icon Conditionnementicon
MZFBN0W10MultiScreenHTS 384 FB, 1,0 / 0,65 µm, opaque, non stérile0,6510 Prix & Disponibilité
MZFBN0W50MultiScreenHTS 384 FB, 1,0 / 0,65 µm, opaque, non stérile0,6550 Prix & Disponibilité
MZFCN0W10MultiScreenHTS 384 FC, 1,2 / 0,65 µm, opaque, non stérile0,6510 Prix & Disponibilité
MZFCN0W50MultiScreenHTS 384 FC, 1,2 / 0,65 µm, opaque, non stérile0,6550 Prix & Disponibilité

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Plaques MultiScreen Harvest Supprimer le tri & les filtres
Référenceicon Descriptionicon Dimension de pores (µm)icon Conditionnementicon
MAHFB1H60MultiScreen Harvest, APFB, opaque, puits de 100 µl1,060 Prix & Disponibilité
MAHFC1H60MultiScreen Harvest, APFC, opaque, puits de 100 µl1,260 Prix & Disponibilité

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Accessoires Supprimer le tri & les filtres
Référenceicon Descriptionicon Conditionnementicon
MATAH0P00Film adhésif pour sceller les plaques MultiScreen, opaque, non stérile100 Prix & Disponibilité
MATAHCL00Film adhésif pour sceller les plaques MultiScreen, transparent, non stérile100 Prix & Disponibilité
MAVM0960RSupport de filtration sous vide MultiScreen 96 puits1 Prix & Disponibilité
MSTPCWH50Adaptateur Packard Top Count pour plaque MultiScreenHTS 96 puits50 Prix & Disponibilité
MSVMHTS00Support de filtration sous vide MultiScreenHTS1 Prix & Disponibilité

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    Documentation

    Informations techniques

    Titre
    MultiScreen HTS 384-well Glass Fiber Filter Plates
    Optimizing Radioisotope Detection Using MultiScreen Plates with Wallac Microbeta Liquid Scintillation Counters

    Fiche technique

    Titre
    MultiScreen HTS Glass Fiber Filter Plates
    MultiScreen HTS Vacuum Manifold
    MultiScreen Harvest Plates

    Références bibliographiques | 33 Disponible | Voir toutes les références

    Aperçu de la référence bibliographiqueApplication
    Receptor binding assay for nitric oxide- and heme-independent activators of soluble guanylate cyclase.
    Peter Schmidt, Matthias Schramm, Henning Schroder and Johannes-Peter Stasch
    Analytical Biochemistry 314 (1): 162-165 2003

    High-throughput receptor-binding methods for somatostatin receptor 2
    Birin ET, Rohrer SP,Anal. Biochem. 2002 Aug 1; 307 (1):159-66
    Anal. Biochem. 2002 Aug 1; 307 (1):159-66 2002

    Development of 5-hydroxytryptamine(2A) receptor binding assay for high throughput screening using 96-well microfilter plates
    Harms A, Gundisch D, Muller CE, Kovar KA
    J Biomol Screen. 2000 Aug;5(4):269-78 2000

    Quantitative and functional characterization of muscarinic receptor subtypes in insulin-secreting cell lines and rat pancreatic islets
    Iismaa, Tiina P. et al.
    Diabetes, 49, 3, 392, 2000 2000

    Cell Harvesting, Receptor/Ligand Binding Assays
    An immunoassay for assessment of receptor tyrosine kinase autophosphorylation
    Grace R. Nakayama, Zahra Parandoosh
    Journal of immunological methods 225 (1999), 67-74 1999

    Islet cell membrane antigens activate diabetogenic (CD4.sup. +) T-cells in BB/Wor rat
    Ellerman, Karen E. et al.
    Diabetes, 48, 5, 975, 1999 1999

    Cell Harvesting, Receptor/Ligand Binding Assays
    Quantitative cell membrane-based radioligand binding assays for parathyroid hormone receptors.
    Sam R. J. Hoare and Ted B. Usdin
    Journal of Pharmacological and Toxicological Methods 41 (2-3): 83-90 1999

    Synthesis and Structure-Activity Relationship of a New Series of Potent AT1 Selective Angiotensin II Receptor Antagonists: 5-(Biphenyl-4-ylmethyl) pyrazoles
    Carmen, A., Gomez, L.A., Cavalcanti, F.L., deArriba, A.F., Garcia-Rafanell, J., and Forn, J.
    J. Med. Chemical 40: 547-558 1997

    Cell Harvesting, Receptor/Ligand Binding Assays
    Mutagenesis of Acidic Residues in the Oxygenase Diomain of Inducible Nitric-Oxide Synthase Identifies a Glutamate Involved in Arginine Binding
    Gachhui, R., Ghosh, D.K., Wu, C., Parkinson, J., Crane, B.R., Stuehr, D.J.
    BioChemistry. 36:17. 5097 - 5103 1997

    Cell Harvesting, Receptor/Ligand Binding Assays
    Binding sites of nitric oxide synthases
    Lui, Q., Gross, S. S.; Methods in Enzymology, 268: 3-11-324, 1996
    Methods in Enzymology, 268: 3-11-324, 1996 1996

    Cell Harvesting, Receptor/Ligand Binding Assays

    Manuels d'utilisation

    Titre
    MultiScreen Harvest Plates
    MultiScreen®HTS and MultiScreen®HTS+ Hi Flow Assay Systems

    C7747

    Les études de fixation sur les récepteurs sont un élément essentiel de l'identification de médicaments candidats et des processus ultérieurs de caractérisation de ces molécules. Elles servent à caractériser la plupart des cibles médicamenteuses connues et utilisent en général la technologie de séparation à base de filtration pour obtenir les fractions "liées/libres" nécessaires à la validation des études. A des fins de sensibilité et de spécificité, on utilise des médicaments connus radiomarqués pour les essais de liaison compétitive. L'essai est conçu comme un essai d'inhibition par compétition utilisant l'interaction entre un médicament connu radiomarqué et le récepteur du ligand pour cribler des banques de produits chimiques ou naturels à la recherche de nouvelles entités chimiques plus efficaces.

    Ces mesures quantitatives des paramètres de fixation déterminent les concentrations médicamenteuses minimales efficaces. L'utilisation de plaques MultiScreenHTS pour l'étude des paramètres quantitatifs de fixation est une alternative, plus précise et plus fiable, aux essais homogènes. Elles sont largement utilisées dans les campagnes de screening à haut débit et offrent une plateforme fiable, équipée de différents filtres en fibre de verre pour retenir le récepteur et la fraction ligand "lié". Leur fonctionnement à l'aide du support de filtration sous vide facilite les caractérisations puisque les fractions liées sont aisément récupérées par le haut de la plaque.

    La conception améliorée des plaques de filtration MultiScreenHTS compatibles avec les systèmes automatisés facilite l'utilisation de bras de préhension et leur adaptation sur les lecteurs à scintillation pour plaques.

    Il existe également des plaques MultiScreen Harvest capables de supporter les nombreux lavages et pré-traitements (PEI) en batch requis par les protocoles de récolte cellulaire.

    • Dosages radiométriques hautement sensibles et spécifiques
    • Compatibles avec les cocktails de liquides de scintillation
    • Meilleure compatibilité des nouvelles plaques de filtration MultiScreenHTS avec les systèmes automatisés

    Protocole

    1. Ajoutez les cellules, la membrane ou le tissu dans la plaque MultiScreen
    2. Incubez avec le ligand marqué
    3. Récupérez le complexe récepteur/ligand sur la membrane filtrante. Lavez et comptez. Dans le cas d'une étude "libre/lié", récupérez le filtrat dans une plaque à 96 puits

    Performances

    Une conception optimisée pour des résultats de grande qualité

    Expérience de déplacement de la liaison au récepteur humain muscarinique M1 en format 384 puits

    Expérience de déplacement de la liaison au récepteur humain muscarinique M1 en format 96 puits

    Des expériences de déplacement de ligand radiomarqué lié au récepteur ont été réalisées en  présence d'une concentration fixe (0,6 nM) de scopolamine radiomarquée et d'une série de  dilutions de pirenzipine froide (non marquée) et comparées à une expérience de déplacement de contrôle sans pirenzipine froide (% du contrôle). A gauche : expérience de déplacement réalisée avec une préparation de 4,38 µg de récepteur dans 100 µl au moyen d'une plaque de filtration MutliScreen<sub>HTS</sub> 384 puits. Les résultats présentés proviennent de trois expériences séparées ayant chacune trois répétitions (trois puits). A droite : expérience de déplacement réalisée avec une  préparation de 8,75 µg de récepteur dans 200 µl au moyen d'une plaque de filtration MutliScreen 96 puits. Les valeurs relatives d'affinité (IC50) ont été déterminées en ajustant les valeurs d'inhibition de la liaison par le déplacement suivant une régression non linéaire au moyen du logiciel Prism™. Chaque point est la moyenne de trois expériences. Les plaques de filtration ont été séchées avant l'addition de Supermix™ (10 µl dans les plaques à 384 puits et 50 µl dans les plaques à 96 puits). Le comptage a été effectué dans un lecteur MicroBeta® Trilux. REMARQUE : Pour les plaques à 96 puits et les plaques à 384 puits, le comptage est fait avec le drain en place.

    Des expériences de déplacement de ligand radiomarqué lié au récepteur ont été réalisées en présence d'une concentration fixe (0,6 nM) de scopolamine radiomarquée et d'une série de dilutions de pirenzipine froide (non marquée) et comparées à une expérience de déplacement de contrôle sans pirenzipine froide (% du contrôle). A gauche : expérience de déplacement réalisée avec une préparation de 4,38 µg de récepteur dans 100 µl au moyen d'une plaque de filtration MutliScreenHTS 384 puits. Les résultats présentés proviennent de trois expériences séparées ayant chacune trois répétitions (trois puits). A droite : expérience de déplacement réalisée avec une préparation de 8,75 µg de récepteur dans 200 µl au moyen d'une plaque de filtration MutliScreen 96 puits. Les valeurs relatives d'affinité (IC50) ont été déterminées en ajustant les valeurs d'inhibition de la liaison par le déplacement suivant une régression non linéaire au moyen du logiciel Prism™. Chaque point est la moyenne de trois expériences. Les plaques de filtration ont été séchées avant l'addition de Supermix™ (10 µl dans les plaques à 384 puits et 50 µl dans les plaques à 96 puits). Le comptage a été effectué dans un lecteur MicroBeta® Trilux. REMARQUE : Pour les plaques à 96 puits et les plaques à 384 puits, le comptage est fait avec le drain en place.